一、选择题（每题1.5分，共60分）
1．在营养丰富、水分充足、气温适宜、黑暗密闭的环境下，分别培养下列生物，经过一段时间后，它们中仍能生存的是
A．乳酸菌 B．白菜 C．蘑菇 D．毛霉 2．膳食中含有少量的亚硝酸盐，其主要危害是
A．杀死细胞 B．形成致癌物，诱发基因突变 C．影响营养物质的吸收 D．在肾脏中积累
3．图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化过程，下列叙述正确的是
A.过程①和②都只能发生在缺氧条件下 B.过程①和③都发生在酵母细胞的线粒体中 C.过程③和④都需要氧气的参与 D.过程①一④所需的最适温度基本相同 4．下列关于腐乳和泡菜制作的叙述中，正确的是
A．主要菌种都是原核生物 B．制作过程都不必严格无菌操作 C．所用的装置都需要密封 D．所用的菌种都需要人工接种 5．关于果酒的制作过程，下列叙述中正确的是
A．先去烂子粒和枝梗，再用清水冲洗掉污物 B．发酵的温度维持在18～25 ℃最好 C．发酵过程中需要适时打开瓶盖放气，以防止发酵瓶破裂 D．需要不断地充入氧气
6．下列有关泡菜制作过程的叙述，不正确的是 A．按清水与盐的质量比为4：1的比例配制盐水 B．按照清水与盐的质量比为5：1的比例配制盐水 C．盐水入坛前要煮沸、冷却，以防止污染 D．坛盖边沿的水槽中注满水，以保证坛内无氧环境
7．在制作泡菜时，乳酸菌产生的乳酸可以抑制异种生物的生长，但乳酸积累到一定程度时，又会抑制乳酸菌自身的增殖。这些现象中包括的生态因素有
A．竞争和种内斗争 B．种内互助、竞争和种内斗争 C．竞争和种内互助 D．种内互助和种内斗争
8．腐乳制作过程中要注意防止杂菌污染，下列措施中，不能起到抑制杂菌污染作用的是 A．加入12％的料酒 B．逐层加盐
C．装瓶时让瓶口通过酒精灯火焰 D．用含水量为70％的豆腐制腐乳 9．下列关于传统发酵技术的叙述，错误的是 A．家庭制作果酒、果醋、腐乳可以不用专门接种 B．制作果酒、果醋、腐乳的主要菌种，都能进行有氧呼吸 C．制作果酒、果醋、腐乳的主要菌种，只有毛霉是真核生物 D．制作果酒、果醋、腐乳过程中所需温度最高的是果醋的制作 10．下列关于腐乳制作的描述中，错误的是
A．在腐乳制作过程中必须有能产生蛋白酶的微生物参与 B．含水量大于85%的豆腐利于保持湿度，适宜制作腐乳 C．加盐和加酒都能抑制微生物的生长
D．密封瓶口前最好将瓶口通过火焰以防杂菌污染
11．利用酵母菌酿酒时，从开始便持续向发酵罐内通入无菌空气，结果是 A．酵母菌大量死亡，酒精减产 B．酵母菌数量不变，酒精产量不变 C．酵母菌数量增多，酒精减产 D．酵母菌数量增多，不产生酒精 12．下列叙述错误的是
A．醋酸菌可在有氧条件下利用乙醇产生醋酸 B．酵母菌在无氧条件下利用葡萄汁产生酒精 C．泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸发酵 D．腐乳制作利用毛霉等微生物直接对蛋白质等的分解 13．下列关于检验发酵产物的说法中，正确的是
A．果汁发酵是否产生酒精，可用溴麝香草酚蓝溶液检验 B．检验醋酸可以品尝或用pH试纸测定 C．泡菜制作中亚硝酸盐的含量不能确定
D．测定果酒、果醋的产生和亚硝酸盐的含量均可用品尝法 14．判断果酒和果醋制作是否成功的方法不合理的是 A．通过观察相关微生物的存在或数量变化进行鉴定
B．通过向果酒发酵样液中加入硫酸再加入重格酸钾试剂进行鉴定 C．通过检测果醋发酵前后发酵液的pH变化进行鉴定 D．通过检测果酒发酵前后发酵液的温度变化进行鉴定 15．下列关于“腐乳的制作”叙述错误的是
A．制作腐乳时毛霉等多种微生物共同发挥作用 B．毛霉生长的最适温度为30℃～35℃ C．后期发酵时间长短与用盐量、卤汤成分等有关 D．封瓶时最好将瓶口通过酒精灯的火焰 16．豆腐上长出了毛霉之后，下一步要加盐腌制。加盐作用不包括：
A．浸提毛霉菌丝上的蛋白酶 B．析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬 C．促进毛霉的生长 D．抑制杂菌的生长避免豆腐腐败变质 17．下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述,正确的是 A．果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵 B．使用的菌种都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA C．在腐乳制作过程中没有能产生蛋白酶的微生物参与 D．腐乳制作所需要的适宜温度最高 18．关于酸奶制作，下列说法正确的是
A．含抗生素的牛奶更容易发酵 B．温度越高，制作酸奶需要的时间越长 C．牛奶变酸的同时，其中的糖类发生了变化 D．制作过程中需不断通入无菌空气 19．在果酒、果醋和泡菜制做过程中，所用原料的有机物总量及种类变化是 A．减少、增加 B．减少、减少 C．增加、增加 D．增加、减少 20．下列有关涂布平板操作的叙述，不正确的是
A．首先将菌液进行一系列的梯度稀释 B．将涂布器在酒精灯火焰上灼烧,直到烧红 C．取少量菌液滴加在培养基表面 D．涂布时可转动培养皿，使涂布均匀 21．刚果红染色时，加入刚果红应在
①制备培养基时 ②梯度稀释时 ③倒平板时 ④涂布时 ⑤长出菌落时 A．①③ B．②⑤ C．③⑤ D．④⑤ 22．要将从土壤中提取的自生固氮菌与其他细菌分离开来，应将它们接种在 A．含五大类营养物质的培养基上 B．加入某种指示剂的鉴别培养基上 C．含蛋白胨等营养物质的培养基上 D．无氮的选择培养基上 23．能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是
A．C02和N2 B．葡萄糖和NH3 C．C02和尿素 D．葡萄糖和尿素 24．从土壤中筛选纤维素分解菌的实验设计正确的是 A．土壤取样→梯度稀释→稀释涂布平板→发酵培养 B．土壤取样→选择培养→稀释涂布平板→挑选菌落 C．土壤取样→梯度稀释→选择培养→挑选菌落
D．土壤取样→梯度稀释→稀释涂布平板→选择培养→挑选菌落
25．含氨苄青霉素的LB培养基在基因工程中有很重要的应用。该培养基能杀死一切不抗氨苄青霉素的细菌，只有对氨苄青霉素具有抗性的细菌才能正常生长繁殖。由其作用可知该培养基是一种 A．固体培养基 B．液体培养基 C．鉴别培养基 D．选择培养基
26．某研究小组欲研究被石油污染过的土壤中细菌的数量，并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作错误的是
A．称取和稀释被污染的土壤时应在火焰旁 B．用以石油为唯一碳源的培养基进行筛选 C．分离菌种时可采用稀释涂布平板法接种 D．对细菌进行计数时宜采用平板划线法接种 27．尿素是尿素分解菌的氮源，因此在配制培养基时 A．葡萄糖在培养基中越多越好
B．尿素分解菌有固氮能力，故培养基中只需无机氮 C．尿素在培养基中越少越好
D．尿素分解菌无固氮能力，故培养基中应加入尿素做为氮源 28．下列对灭菌和消毒的理解，不正确的是
A．灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子 B．消毒和灭菌实质上是完全相同的 C．接种环、接种针用灼烧法灭菌
D．常用灭菌方法有灼烧法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法
29．青霉素是一种常用抗生素,它可抑制肽聚糖（细菌细胞壁的主要成分）的合成,则下列生物中能在含有青霉素的培养基中正常生长的是
A．乳酸菌和酵母菌 B．蘑菇和大肠杆菌 C．毛霉和酵母菌 D．绿藻和结核杆菌 30．分离土壤中分解尿素菌的实验操作中，下列有关操作错误的是 A.选取表层土样制备土壤浸出液
B.取土样的铁铲和装土样的信封在使用前均需灭菌 C.用添加了尿素作为氮源的肉汤培养基分离细菌 D.选取菌落数在30—300之间的平板用于计数 31．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红的目的是
A．分离出能分解尿素的细菌 B．给分解尿素的细菌提供营养 C．对分离的菌种作进一步的鉴定 D．维持正常pH抑制杂菌的生长繁殖
32．细菌培养基通常在121℃ 压力锅中灭菌。如果只有在100℃的温度下将细菌培养基灭菌，以下
哪一种生物仍会存活？
A．大肠杆菌 B．一种青霉菌 C．枯草芽孢杆菌 D．鼠伤寒沙门氏菌 33．大肠杆菌能够在哪种培养基上生长繁殖
A．无氮培养基 B．分解尿素的细菌的选择培养基 C．纤维素分解菌的选择培养基 D．牛肉膏蛋白胨培养基 34．我过民间常用盐渍法来保存食物，其中的道理是 A．盐可以使细菌毒素失效 B．Cl可以杀灭细菌 C．盐中缺乏细菌需要的营养 D．盐可以使细菌脱水死亡
35．测定土壤中细菌的数量一般选10、10和10倍的稀释液进行平板培养；而真菌的数量一般选用10、10和10倍稀释，其原因是
A．细菌个体小，真菌个体大 B．细菌易稀释，真菌不易稀释 C．细菌在土壤中的含量比真菌高 D．随机的，没有原因
36．在分解尿素菌的分离和鉴定中，对先后用到的两种培养基，叙述正确的是 A．加入酚红指示剂作为选择培养基，再加入唯一碳源作为鉴别培养基 B．加入唯一氮源作为选择培养基，再加入酚红指示剂作为鉴别培养基 C．加入唯一氮源作为鉴别培养基，再加入酚红指示剂作为选择培养基 D．加入唯一碳源作为选择培养基，再加入酚红指示剂作为鉴别培养基
37．在做分离分解尿素的细菌实验时，甲同学从对应10倍稀释的培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。甲同学的结果产生原因可能有 ①土样不同 ②培养基污染 ③操作失误 ④没有设置对照 A．①②③ B．②③④ C．①③④ D．①②④
38．下图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析正确的是
6
2
3
4
4
5
6
-
A．3号试管的稀释倍数为10倍
B．4号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数恰为5号试管的10倍 C．5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1．7×10个 D．该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高
9
3
39．在筛选纤维素分解菌的过程中，通常用刚果红染色法，这种方法能够通过颜色反应直接对纤维素分解菌进行筛选。某同学在实验时得到了如图所示的结果，则纤维素分解菌位于 A．①② B．③ C．②③ D．①②③
40．漆酶属于木质降解酶类，在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。下图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程，相关叙述错误的是
A．生活污水中含有大量微生物，是分离产漆酶菌株的首选样品 B．筛选培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落 C．在涂布平板上长出的菌落，在通过划线进一步纯化
D．在适宜温度下，接种后的斜面培养基上菌落长成后，可在低温下临时保存菌株 二、简答题（每空1分，共40分）
41（7分）．苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的，回答下列为题：
（1）酵母菌的呼吸代谢途径如图所示。图中过程①和②是苹果醋生产的第一阶段，在酵母菌细胞的_________________中进行，其产物乙醇与_________________试剂反应呈现灰绿色，这一反应可用于乙醇的检验；过程③在酵母菌细胞的________________中进行，与无氧条件相比，在有氧条件下，酵母菌的增殖速度________________。
（2）第二阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程，根据醋酸杆菌的呼吸作用类型，该过程需要在________________条件下才能完成。
（3）在生产过程中，第一阶段和第二阶段的发酵温度不同，第一阶段的温度____________（填“低于”或“高于”）第二阶段。
（4）醋酸杆菌属于___________核生物，其细胞结构中 （填“含有”或“不含有”）线粒体。 42．（11分）某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题：
（1）制作泡菜时，起主要作用的微生物是____________。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的
盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是____________________。在发酵初期，很多杂菌会大量繁殖，其中导致泡菜水的表面长白膜的微生物是____________。此过程中亚硝酸盐的变化规律是 ，此过程中乳酸菌和其他杂菌之间的种间关系是 。 （2）分离纯化乳酸菌时，首先需要用_________________对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是___________________________________。
（3）推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有_________________和_________________。分离纯化时应挑选出_________________的菌落作为候选菌。
（4）乳酸菌在-20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的_________________（填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”）。
43、（9分）随着环境污染的加剧和石油危机出现，越来越多的国家使用乙醇作为代替燃料，生产中玉米和麦草的秸秆可以用来生产燃料乙醇，已知秸秆的主要成分是纤维素，回答下列问题： （1）人们首先利用纤维素分解菌将纤维素分解，纤维素分解菌多分布在__________的土壤中，该微生物产生的纤维素酶是一种复合酶，一般包括三种成分，_______________，__________________和__________________。前两种酶能使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。 （2）从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制__________________培养基，该培养基中需要加入纤维素粉作为唯一的__________________。
（3）经过梯度稀释后，要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是______，当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生_________来筛选纤维素分解菌。当利用涂布器涂布平板之后需要对涂布器进行__________处理。（添“消毒”或者“灭菌”） 44．（7分）乙草胺是除草剂中常见的化学成分，在土壤和水体中存在时间长，难以降解。请回答下列问题：
（1）实验小组欲从土壤中获取乙草胺降解菌，需将土壤样品置于以________为唯一碳源的培养基中进行富集培养。
（2）该实验小组选取乙草胺浓度为800mg/L的富集液进行系列稀释，分别取10/10和10倍数的稀释液0.1mL涂布于培养基上，每个稀释倍数涂布三个平板，各平板的菌落数分别为（286、298、297），（35、32、31），（36、7、2）。
①不适合用于计数的为________倍数的稀释液，用另外两组稀释倍数进行计数得到的细菌数不一致的原因可能是___________________________ 。
②某同学认为为了防止杂菌的污染，可在培养基中加入青霉素，你觉得该同学的说法是否确？__________，理由是_________________。
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（3）实验小组从土壤中筛选出两株乙草胺降解菌D1和D2，温度对两株降解菌的生长的影响如下图所示。对温度适应范围更广的是菌株___________，温度会影响菌株的生长状况的原因是_______________。
45．（6分）恒化器是微生物连续培养时使用的大型容器，容器中一部分旧的培养基以一定的速度流
出，同时不断有等量的新鲜培养基流入以保证微生物对营养物质的需要。研究人员将大肠杆菌JA122菌株接种到葡萄糖含量受到限制的培养基中，在恒化器内连续培养773代，然后取样分析其中存在的新菌株。请回答下列问题：
（1）用于连续培养JA122大肠杆菌的培养基属于 。培养基中除了含葡萄糖作
为 外，还应该含有 。
（2）对三种菌株的代谢差异进行分析发现，CV103对葡萄糖吸收率最高，代谢终产物是醋酸盐。进
一步研究表明，CV101可以在过滤的培养过CV103的培养基中生长，反过来CV103不能在过滤的培养过CV101的培养基中生长，据此作出的推测是： 。请设计并完成下列实验步骤，来验证你的观点。
①配制 的培养基；
②将CV101和CV103菌株分别接种到新配制的培养基中培养一段时间，并观察记录菌株的生长情况。
③预期实验结果： 。
高二年级 生物参考答案
一、选择题（每题1.5分，共60分）
题号 答案 题号 答案 题号 答案 题号 答案
1 A 11 D 21 C 31 C 2 B 12 D 22 D 32 C 3 C 13 B 23 D 33 D 4 B 14 D 24 B 34 D 5 B 15 B 25 D 35 C 6 B 16 C 26 D 36 B 7 B 17 B 27 D 37 A 8 D 18 C 28 B 38 C 9 C 19 A 29 C 39 B 10 B 20 B 30 C 40 A
二、简答题（每空1分，共40分） 41（7分）．
（1）细胞质基质 重铬酸钾 线粒体 加快 （2）有氧 （3）低于
（4）原核 不含有 42．（11分）
（1）乳酸菌 提供乳酸菌菌种 酵母菌 先增多后减少 竞争
（2）无菌水 在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的乳酸菌将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落
（3）中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸 利于乳酸菌的识别和分离 在平板上有溶钙圈 （4）甘油
43、（9分）
（1）富含纤维素 C1酶 Cx酶 葡萄糖苷酶 （2）选择 碳源 （3）刚果红 透明圈灭菌
44．（7分） （1）乙草胺 （2）
① 10
稀释倍数为10时，更多的菌落连在一起最终形成单菌落，导致结果小于稀释倍数为 10 组。 ②不正确，青霉素抑制杂菌繁殖的同时，也会抑制目的菌的繁殖。 （3）D1 温度会影响与菌株生长代谢有关酶的活性
45．（6分）
（1）液体培养基 碳源 氮源、水、无机盐 （2）
-3
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-5
①CV101以CV103产生的醋酸盐为碳源
③以醋酸盐为唯一碳源 CV101能生长、CV103不能生长
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