乳与乳制品非常规理化指标检验奶酪的检测

YLNB 5.5

一．脂肪的测定：

1. 依据： IDF5:2004(E)。

2. 范围：酪蛋白含量较高的奶酪制品。

3. 试剂：

3.1盐酸溶液：质量分数约25%，即将浓度为37%的浓盐酸675ml加水稀释至1000ml,摇匀，此溶液要求保证盐酸的浓度。

3.2乙醇或由甲醇变性的乙醇：体积分数至少为94%。

3.3乙醚：不含过氧化物，不含抗氧化剂，或抗氧化剂含量不大于2mg/kg，并满足空白试验的要求。

3.4 石油醚：沸程30-60℃。

3.5 混合溶剂：等体积混合乙醚（3.3）和石油醚（3.4），使用前配制。

4.设备：

4.1 离心机：可安放脂肪抽提瓶，转速为500-600r/min，可在抽脂瓶外端产生80—90g的重力场。

4.2蒸馏器或蒸发器：可在不超过100℃情况下，蒸馏除掉脂肪收集瓶中的溶剂和乙醇.

4 .3烘箱：温度可控制在102±2℃。

4.4水浴：温度可控制在65℃±5℃。

4.5毛氏抽脂瓶：抽脂瓶应带有适当的优质软木塞或其他不影响溶剂使用的瓶塞（如硅胶或聚四氟乙烯）。软木塞应先浸于乙醚中，后放入60℃或60℃以上的水中保持至少15min，然后在水中冷却，使用时木塞已饱和，不用时要一直浸泡在水中，浸泡用水每天更换一次。

4.6 支架：放置抽脂瓶。

4.7 洗瓶：适合装混合溶剂,不能使用塑料洗瓶。

4.8脂肪收集瓶：例如：容量为100-250ml可加热三角瓶（平底烧瓶），

4.9 沸石：无脂肪、无气孔的瓷片或碳化硅或玻璃珠（用金属皿的情况下）。

4.10 量筒：5ml和25ml。

4.11吸量管：10ml刻度吸管。

4.12 金属夹钳：用于夹烧瓶、烧杯和皿。

4.13 毛氏抽脂瓶摇混器：可夹放毛氏抽脂瓶，摆动频率为100±10次/min。

5 操作步骤

5.1 脂肪收集瓶的准备

在干燥的脂肪收集瓶中加入几粒沸石，放入烘箱中干燥1h。使收集瓶冷却（防尘）至天平室的温度（玻璃收集瓶至少需要1h，金属皿至少0.5h）。收集瓶不可放入干燥器中，避免冷却不充分或冷却时间过长。

5.2样品操作:

5.2.1称取1g样品于抽脂瓶中,加入8-9ml的25%的盐酸，在沸水浴中加热溶解20-30分或在电热板上加热10分钟，直到溶解，时而振荡一次，取出，用水冷却至室温。同时作空白，在抽脂瓶中不加样品，只加入10mL25%盐酸，其他操作同样品检测。

5.2．2加入10mL乙醇，轻轻地使内容物在小球和柱体间来回流动，彻底地进行混合，避免太接近瓶颈。

5.2.3加入25mL乙醚，塞上被水饱和的软木塞，或用水浸湿的其他瓶塞，将抽脂瓶保持在水平位置，小球的延伸部分朝上夹在摇混器上，按约100次/min振荡烧瓶1min，不要过度（避免形成持久乳化液）。必要时将抽脂瓶放在流水中冷却，然后小心地打开塞子，用少量的混合溶剂冲洗塞子和瓶颈 冲洗时使用洗瓶，使冲洗液流入抽脂瓶或已准备好的脂肪收集瓶中。

注：如没有摇混器，可用手进行振荡。

5.2.4 加入25mL石油醚，塞上重新润湿的塞子（浸入水中），接5.2.3所述，轻轻振荡30s。

5.2.5.将加塞的抽脂瓶放入离心机中，在500-600r/min下离心5min。如果没有离心机，则将抽脂瓶放到支架上，静止至少30min，直到上层液澄清，并明显与水相分离。必要时，放在流水中冷却抽脂瓶。

5.2.6 小心地打开软木塞或瓶塞，用少量的混合溶剂冲洗塞子和瓶颈内壁，使冲洗液流入抽脂瓶或脂肪收集瓶中。

如果两相界面低于小球与瓶身相接处，向抽脂瓶壁边缘慢慢地加入水，使液面高于小球和瓶身相接处，以便于倾倒。

5.2.7 手持抽脂瓶的小球部，小心地将上层液尽可能地倒入已准备好的含有沸石的脂肪收集瓶中，避免倒出水层。

5.2.8 用少量混合溶剂冲洗瓶颈外部，冲洗液收集在脂肪收集瓶中。小心操作，以防溶剂溅到抽脂瓶的外面。

按上所述，采用蒸馏或蒸发的方法，去除脂肪收集瓶中的溶剂或部分溶剂。

5.2.9 重复操作，进行第二次抽提，不加乙醇，只用15mL乙醚和15mL石油醚，用混合溶剂冲洗瓶颈内壁。

5.2.10 重复操作，进行第三次抽提，只用15mL乙醚（3.5）和15mL石油醚，用混合溶剂，冲洗瓶颈内壁。

5.2.11采用蒸馏的方法去除收集瓶中的溶剂，蒸馏前用少量混合溶剂冲洗瓶颈内部。

5.2.12 将脂肪收集瓶放入102℃±2℃的烘箱（4.3）中加热1h，取出收集瓶，冷却至天平室的温度（不要放入干燥器中，但要放防尘，玻璃容器冷却至少1h，金属容器冷却至少0.5h）。称量，精确至0.1mg。称量前不要擦收集瓶。用夹钳将收集瓶放到天平上（避免温度变化）。

5.2.13 重复操作，直到脂肪收集瓶两次连续称量不超过0.5mg，记录收集瓶和抽提物的最低质量。

6. 分析结果表述

m1m2m3m4样品中脂肪的含量（g/100g）=

m0100

式中：m0—样品的质量（5.2.1），g；

m1— 烘干后测得的脂肪收集瓶和抽提物的质量，g；

m2—脂肪空收集瓶的质量，g;

m3—空白试验中，测定后烘干的脂肪收集瓶质量，g；

m4—空白试验中脂肪收集瓶的质量， g。

报告质量分数结果精确至0.01%

7 允许差

7.1重复性

同一实验室、同一分析人员、使用同一种方法、相同的检测设备，对同一样品在短时间内进行试验，在所用检测的样品中，不得有5%的样品的两次测定结果的绝对差值超过0.30%；

7.2 重现性

不同实验室，不同分析人员，不同检测设备，使用同一种方法对同一样品进行试验，在所用检测的样品中，不得有5%的样品的两次测定结果的绝对差值超过0.40%；

二、奶酪食盐的检测

1、依据：AS2300.1.3-1988

2、试剂：

2.1 0.05 mol/L的硝酸银；

2.2 0.05 mol/L的硫氰酸钾标准溶液；

2.3 去离子水；

2.4 5 mol/L的硝酸；

2.5硫酸亚铁氨指示剂：在50g硫酸亚铁氨中加入90mL水和5mL5mol/L硝酸混合；

3、操作步骤：

3.1称取2g（准确到0.005g）样品于250mL的三角瓶中；

3.2加入10mL去离子水和25mL0.05mol/L的硝酸银，在75—80℃的水浴中加热使其溶解；

3.3加入10mL浓硝酸并不断搅拌到混合均匀，约7-10分钟，使溶液澄清，脂肪得到分离；

3.4加入2mL硫酸亚铁氨指示剂和10mL水，用0.05mol/L的硫氰酸钾标准溶液滴定至橘红色，15秒不褪色，同时作空白实验，不加样品，其他同上，得到消耗硫氰酸钾的体积V0。

3.5 通过消耗的硫氰酸钾溶液的体积V计算奶酪制品的食盐含量；

其中： 1mL0.05mol/L的KCNS=0.00292gNaCl

4. 计算结果：

食盐含量

%V0V0.00292WC0.05100

其中：

W—样品质量，g；

V—消耗硫氰酸钾体积，mL；

V0—空白消耗硫氰酸钾3体积，mL；

C-硫氰酸钾摩尔浓度，mol/L；

0.00292—1ml0.05 mol/L的硫氰酸钾溶液相当的氯化钠的克数。

计算结果保留到小数点后两位。