一、名词解释
1、生物技术：也称生物工程，是人们以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术手段和
其他基础科学的科学原理，按照预先的设计，改造生物体或加工生物原料，为人类生产出所需产品或达到某种目的的一门新兴的、综合性的学科。
2、基因组DNA文库：将某一种基因DNA用适当的限制酶切断后，与载体DNA重组，再
全部转化宿主细胞，得到含全部基因组DNA的种群，称为基因组DNA文库。
3、 选择标记基因：是指该基因的表达产物对选择剂产生抗性，致使转化细胞不受选择剂影
响，能正常生长、发育、分化，从而把转化体选择出来的一类基因。 4、 基因和基因组 DNA分子中具有特定生物学功能的片段称为基因（gene）。一个生物体
的全部DNA序列称为基因组（genome）
5、载体：把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术，送进受体细胞中去进行繁殖或
表达的工具称为载体。
6、cDNA文库：即由mRNA经过反转录成cDNA,然后来构建文库，构建的文库不包含内含子。
7、细胞工程：以生物细胞、组织或器官为研究对象，运用工程学原理，按照预定目标，改变生物性状,生产生物产品，为人类生产或生活服务的科学。 8、.外植体：指用于离体培养的活的植物组织、器官等材料。
9、愈伤组织：在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞，多在外植体切面上产生。
10、体细胞杂交：（原生质体融合）指在人工控制条件下不经过有性过程，两种体细胞原生质体相互融合产生杂种的方法。
11、原生质体：指除去细胞壁的细胞或是说一个被质膜所包围的裸露细胞。
12、干细胞：干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞，它可以化成多种功能细胞。 13、蛋白组学：基因组编码的所有蛋白质，是研究细胞内所有蛋白质及其动态变化规律的学科。
基因组的定义是什么？
基因组是生物体内遗传因子的集合，是某一个特定特种细胞内全部DNA分子的总和。 二、选择题
1. 蛋白质工程的实质是（ D ）
A. 改变氨基酸结构 B. 改造蛋白质结构 C. 改变肽链结构 D. 改造基因结构 2. 基因工程的实质是（ A ）
A. 基因重组 B. 基因突变 C. 产生新的蛋白质 D. 产生新的基因 3. 干扰素经过改造可长期储存，从蛋白质水平上应改变的是（ D ） A. 光氨酸 B. 精氨酸 C. 谷氨酸 D. 半光氨酸 4. 蛋白质工程制造的蛋白质是（ C ）
A. 天然蛋白质 B. 稀有蛋白质 C. 自然界中不存在的蛋白质 D. 血红蛋白质 5. 蛋白质工程的基础是（ A ）
A. 基因工程 B. 细胞工程 C. 酶工程 D. 发酵工程
6. 玉米是生产赖氨酸的好材料，可是产量低，需要改变什么结构就能提高产量（ D ） A. 天冬氨酸激酶 B. 二氢吡啶二羧合成酶 C. 肽酶 D. A、B都是 7. 天然蛋白质合成遵循的法则是（ A
A. 中心法则 B. 转录 C. 翻译 D. 复制 8. 关于蛋白质工程的说法错误的是（ B ）
A. 蛋白质工程能定向改造蛋白质的分子结构，使之更加符合人类的需要
B. 蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子结构
C. 蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子 D. 蛋白质工程又称为第二代基因工程
9. 蛋白质工程的基本操作程序正确的是（ C ）
① 蛋白质分子结构合成 ② DNA合成 ③ mRNA合成 ④ 蛋白质的预期功能 ⑤ 根据氨基酸的序列推出脱氧核苷酸的序列
A. ①→②→③→④→⑤→① B. ⑤→④→③→②→①→② C. ④→①→⑤→②→③→① D. ②→③→⑤→①→②→④ 10. 下列各项与蛋白质结构多样性无关的是（ D ）
A. 氨基酸的种类、数目、排列顺序 B. 构成蛋白质的多肽链的数目 C. 构成蛋白质的肽链的空间结构 D. 氨基酸至少含一个氨基和一个羧基 11. 蛋白质工程中直接操作的对象是（ D ）
A. 氨基酸的结构 B. 蛋白质空间结构 C. 肽链结构 D. 基因结构
12. 当前医学上，蛋白质工程药物正逐步取代第一代基因工程多肽蛋白质类替代治疗剂，则基因工程药物与蛋白质工程药物的区别是（ C ）
A. 都与天然产物完全相同 B. 都与天然产物不相同
C. 基因工程药物与天然产物完全相同，蛋白质工程药物与天然产物不相同 D. 基因工程药物与天然产物不相同，蛋白质工程药物与天然产物完全相同 13. 植物组织培养是指（ C ） A. 离体的植物器官或细胞培育成愈伤组织 B. 愈伤组织培育成植株
C. 离体的植物器官、组织或细胞培养成完整植物体 D. 愈伤组织形成高度液泡化组织 14. 植物体细胞杂交要先去除细胞壁的原因是（ C ） A. 植物体细胞的结构组成中不包括细胞壁 B. 细胞壁使原生质体失去活力
C. 细胞壁阻碍了原生质体的融合 D. 细胞壁不是原生质的组成部分 15. 植物体细胞杂交的结果是（ A ）
A. 产生杂种植株 B. 产生杂种细胞 C. 原生质体融合 D. 形成愈伤组织 16. 科学家把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合，培育出的驱蚊草含有香茅醛，能散发出一种特殊的达到驱蚊且对人体无害的效果。下列关于驱蚊草培育的叙述中，错误的是（ C ）
A. 驱蚊草的培育属于细胞工程育种，其优点是能克服远源杂交不亲和的障碍 B. 驱蚊草培育过程要用到纤维素酶、果胶酶、PEG等试剂或离心、振动、电刺激等方法 C. 驱蚊草培育过程是植物体细胞杂交，不同于植物组织培养，无愈伤组织和试管苗形成 D. 驱蚊草不能通过天竺葵和香茅草杂交而获得是因为不同物种间存在生殖隔离 17. 将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时，下列条件中不需要的是（ D ）
A. 具有完整细胞核的细胞 B. 一定的营养物质和植物激素C. 离体状态 D. 导入指定基因 18. 植物体细胞杂交的目的中错误的是（ D ） A. 把两个植物体的优良性状集中在杂种植株上 B. 获得杂种植株 C. 克服远源杂交不亲和的障碍 D. 实现原生质体的融合 19. 植物组织培养的用途中不正确的是（ D ）
A. 快速繁殖 B. 生产新品种 C. 生产生物碱 D. 生产白细胞介素－2 20. A种植物的细胞和B种植物细胞的结构如下图所示（仅显示细胞核），将A、B两种植物细胞去掉细胞壁后，诱导二者的原生质体融合，形成单核的杂种细胞，若经过组织培养后得到了杂种植株，则该杂种植株是（ C ）
A. 二倍体；基因型是DdYyRr B. 三倍体；基因型是DdYyRr
C. 四倍体；基因型是DdYyRr D. 四倍体；基因型是DdddYYyyRRrr
21. 以下关于原生质的叙述，正确的是（ C ）
A. 原生质泛指细胞内的基质 B. 原生质就是细胞质
C. 一个动物细胞就是一团原生质 D. 细胞膜、细胞核和细胞壁是原生质 22. 不能人工诱导原生质体融合的方法是（ D ）
A. 振动 B. 电刺激 C. PEG试剂 D. 重压 23. 植物细胞表现出全能性的必要条件是（ C ）
A. 给予适宜的营养和外界条件 B. 导入其他植物细胞的基因 C. 脱离母体后，给予适宜的营养和外界条件 D. 将成熟筛管的细胞核移植到去核的卵细胞内 24. 细胞具有全能性的原因是（ C ）
A. 生物体细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能B. 生物体的每一个细胞都具有全能性 C. 生物体的每一个细胞都含有个体发育的全部基因 D. 生物体的每一个细胞都是由受精卵发育来的 25. 植物组织培养过程中的脱分化是指（ C ） A. 植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞 B. 未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程
C. 植物的器官、组织或细胞，通过离体培养产生愈伤组织的过程 D. 取植物的枝芽培育成一株新植物的过程 26. 下列植物细胞全能性最高的是（ A ）
A. 形成层细胞 B. 韧皮部细胞 C. 木质部细胞 D. 叶肉细胞 27. 植物组织培养过程的顺序是（ A ）
① 离体的植物器官、组织或细胞 ② 根、芽③ 愈伤组织 ④ 脱分化⑤ 再分化⑥ 植物体
A. ①④③⑤②⑥ B. ①④③②⑤⑥ C. ①⑤④③②⑥ D. ⑥①④③⑤② 28. 将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时，下列条件中不需要的是（ D ） A. 具有完整细胞核的细胞 B. 一定的营养物质和植物激素 C. 离体状态 D. 导入指定基因 29. 下列有关细胞工程的叙述不正确的是（ C ）
A. 在细胞整体水平上定向改变遗传物质B. 在细胞器水平上定向改变遗传物质 C. 在细胞器水平上定向改变细胞核的遗传物质D. 在细胞整体水平上获得细胞产品 30. 下列细胞全能性最高的是（ C）
A. 植物的卵细胞B. 植物的精子细胞C. 被子植物的受精卵D. 被子植物的的叶肉细胞 31. 植物体细胞杂交的目的是（ C ）
A. 用酶解法去掉细胞壁分离出有活力的原生质体 B. 以人工诱导法使两个不同植物的原生质体融合
C. 用植物组织培养法培养融合的原生质体得到杂种植株D. 通过以上三者来完成 32. 下列提法正确的是（ D ）
A. 原生质专指细胞质 B. 人体内的水都属于原生质
C. 细胞核不是原生质 D. 一个动物细胞就是一团原生质 33.（多选）有关原生质体的下列叙述中，正确的是（ AC ） A. 组成原生质体的主要生命物质是蛋白质和核酸 B. 原生质体包括细胞膜、液泡膜及两者之间的原生质
C. 被脱掉细胞壁的植物裸露细胞是原生质体 D. 原生质体只能用于植物细胞工程 34.（多选）下图为植物组织培养过程示意图，则下列叙述正确的是（ ABD ）
A. 植物组织培养依据的生物学原理是细胞的全能性 B. ③→④过程是指植物的营养生长和生殖生长阶段
C. 将①经脱分化培养成②时，再植上人造种皮即可获得人工种子 D. ②→③的再分化过程中，诱导②生根的激素为细胞分裂素和生长素 35、基因工程操作的三大基本元件是 （A ） I 供体 II 受体 III 载体 IV 抗体 V 配体
Ａ I + II + III Ｂ I + III + IV Ｃ II + III + IV Ｄ II + IV + V Ｅ III + IV + V 36、基因工程的单元操作顺序是 （ B ）
Ａ 增，转，检，切，接 Ｂ 切，接，转，增，检 Ｃ 接，转，增，检，切 Ｄ 检，切，接，增，转 Ｅ 切，接，增，转，检
37、mRNA 分离纯化技术的关键是 （ E）
Ａ 细胞的温和破碎 Ｂ 分离系统中不得含有痕量的 SDS Ｃ 高离子强度缓冲液的使用 Ｄ 密度梯度超离心 Ｅ 严防核酸酶的降解 38、cDNA 第一链合成所需的引物是 （ D ）
Ａ Poly A Ｂ Poly C Ｃ Poly G Ｄ Poly T Ｅ 发夹结构 39、cDNA 法获得目的基因的优点是 ( B)
Ａ 成功率高 Ｂ 不含内含子Ｃ 操作简便 Ｄ 表达产物可以分泌 Ｅ 能纠正密码子的偏爱性
40、下列基因调控元件中属于反式调控元件的是 （ A） Ａ 阻遏蛋白 Ｂ 启动子 Ｃ 操作子 Ｄ 终止子 Ｅ 增强子 41、包涵体是一种 （ E ）
Ａ 受体细胞中难溶于水的蛋白颗粒 Ｂ 大肠杆菌的亚细胞结构
Ｃ 噬菌体或病毒 DNA 的体外包装颗粒 Ｄ 用于转化动物细胞的脂质体 Ｅ 外源基因表达产物的混合物
42、在基因工程中，外源基因表达产物的重折叠通常是指 （ E ）
Ａ 氢键的形成 Ｂ 离子键的形成 Ｃ 疏水键的形成 Ｄ 酰胺键的形成 Ｅ 二硫键的形成
43、外源基因在大肠杆菌中以融合蛋白的形式表达的优点是 【 B】
I 融合基因能稳定扩增 II 融合蛋白能抗蛋白酶的降解 III 表达产物易于亲和层析分离 Ａ III Ｂ I + II Ｃ I + III Ｄ II + III Ｅ I + II + III 44、基因工程菌中重组质粒的丢失机制是 （ B ）
Ａ 重组质粒渗透至细胞外 Ｂ 重组质粒被细胞内核酸酶降解 Ｃ 重组质粒在细胞分裂时不均匀分配 Ｄ 重组质粒杀死受体细胞 Ｅ 重组质粒刺激受体细胞提高其通透性
45、细胞具有全能性的原因是 （C ）
A．生物体细胞具有发育成完整个体的潜能B．生物体的每一个细胞都具有全能性 C．生物体的每一个细胞都含有个体发育的全部基因 D．生物体的每一个细胞都是由受精卵发育来的
46、植物组织培养过程中的脱分化是指 （C）
A．植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞 B．未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程
C．植物的器官、组织或细胞，通过离体培养产生愈伤组织 D．取植物的枝芽培育成一株新植株的过程 47、与传统育种相比，植物体细胞杂交在育种作物新品种方面的重大突破表现在 （ B ）
A．证明杂种细胞具有全能性B．克服远缘杂交不亲和的障碍
C．缩短育种周期，减少盲目性D．快速培育无病毒植株，保留杂种优势
48、某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为有几处是不正确的是 （ B
技术手段 特殊处理 融合方法 典型应用 培养液区别 植物细胞工程 植物组织培养、植物体细胞杂交 机械法去除细胞壁 物理方法、化学方法 人工种子、杂种植物 蔗糖是离体组织赖以生长的成分 动物细胞工程 动物细胞培养和融合、单抗制备等 胰蛋白酶处理制细胞悬浮液 物理方法、化学方法、生物方法 单克隆抗体的制备 动物血清不可缺少 A．0 B．1 C．2 D．3
49、下列关于植物体细胞杂交过程的叙述中，不正确的是 （ C ）
A．用酶解法去掉细胞壁分离出有活力的原生质体 B．诱导两种植物的原生质体融合进而形成杂种细胞
C．单个的杂种细胞在组织培养过程中不要经过脱分化D．杂种细胞最终培养为杂种植株 50、下列哪种生物技术能有效的打破物种的界限，定向地改造生物的遗传性状，培育新的农
作物优良品种 D
A．单倍体育种技术 B．诱变育种技术 C．杂交育种技术 D．细胞工程技术 51、动物细胞培养的理论基础是 （ A ）
A．细胞分裂 B．细胞分化 C．细胞全能性 D．细胞癌变 52、单克隆抗体的制备过程中引入骨髓瘤细胞的目的是 （ A ）
A．能使杂交细胞大量增殖 B．产生特异性强的个体 C．是细胞融合容易进行 D．是产生的抗体纯度更高
53、下列关于动物细胞培养的叙述中，不正确的是 （ C ）
A．动物细胞培养前要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散开来 B．通常将动物组织细胞消化后的初次培养称为原代培养 C．细胞的癌变通常发生在原代培养向传代培养的过渡过程中
D．传代培养的细胞在传至10~50代左右时，部分细胞的核型可能发生变化 54、目前在治疗癌症方面，一种疗效高，毒副作用小的新型药物问世了，这就是“生物导弹”。
“生物导弹”治疗疾病的基本原理是 （D ） A．癌细胞的识别作用 B．放射性同位素的标记作用 C．化学药物的特异性 D．单克隆抗体的导向作用
55、在下列自然现象或科学研究成果中，能为“动物细胞具有全能性”观点提供直接证据的是 （ B ）
A．壁虎断尾后重新长出尾部 B．蜜蜂的未受精卵细胞发育成雄蜂 C．用体外培养的皮肤治疗烧伤病人 D．小鼠腺细胞的自我复制 56、细胞株的特点是 （ C ）
A．遗传物质没有改变，可以无限传代 B．遗传物质发生改变，不可无限传代
C．遗传物质没有改变，不可无限传代D．遗传物质发生改变，有癌变特点，可以无限传代 57、生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野
驴刚死亡，以下较易成功“复生”野驴的方法是C A．将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分化、再分化，培育成新个体 B．将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体
C．取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵母细胞中，经孕育培养成新个体 D．将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体 58、酶工程的技术过程是 （ C ）
A、利用酶的催化作用将底物转化为产物 B、通过发酵生产和分离纯化获得所需酶 C、酶的生产与应用 D、酶在工业上大规模应用 59、酶的转换数是指 （ C ）
A、酶催化底物转化成产物的数量 B、每个酶分子催化底物转化为产物的分子数 C、每个酶分子每分钟催化底物转化为产物的分子数 D、没摩尔酶催化底物转化为产物的摩尔数
60、有些酶在细胞进入平衡期以后还可以继续合成较长的一段时间，这是由于（ A ）。 A、该酶所对应的mRNA稳定性好 B、该酶所对应的DNA稳定性好 C、细胞自溶后使酶分泌出来 D、培养基中还有充足的营养成分 61、莫诺德常数是指 （ B ）
A、反应速度达到最大反应速度一半时的底物浓度。
B、比生长速率达到最大比生长速率一半时的限制性基质浓度。 C、产酶速率达到最大产酶速率一半时的限制性基质浓度。
D、细胞生长速率达到最大细胞生长速率一半时的限制性基质浓度。 62、端粒酶是 （ C ）
A、催化端粒水解的酶 B、存在于端粒中的酶
C、催化端粒生成和延长的酶 D、催化RNA生成和延长的酶
63、酶分子的物理修饰是通过物理方法改变酶分子（ C ）结构而改变酶的催化特性 A、组成单位 B、侧链基团 C、空间构象 D、空间构型 64、酶分子氨基酸修饰的分子机制 （ C ）
A、只能用于核酸类酶 B、只能用于蛋白类酶
C、可以用于蛋白类酶和核酸类酶 D、不能用于蛋白类酶和核酸类酶 65、用带负电荷的载体制备的固定化酶后，酶的最适pH （ A ）。 A、向碱性一侧移动 B、向酸性一侧移动 C、不改变 D、不确定 66、有机介质中酶催化的最适水含量是 （ C ）
A、酶溶解度达到最大时的含水量 B、底物溶解度最大时的含水量 C、酶催化反应速度达到最大时的含水量 D、酶活力到最大时的含水量
67、在获得酶的单一基因以后，为获得两种以上同源正突变基因，可以采用的技术是A A、易错PCR B、交错延伸PCR C、DNA重排 D、基因组重排
68、采用核糖体表面展示技术，可以形成目的蛋白-核糖体m-RNA三聚体展示在核糖体表面，是由于 （A ）
A、目的蛋白基因在体外进行转录和翻译 B、核糖体表面有目的蛋白的结合位点
C、转录得到的mRNA的3’末端缺失终止密码子 D、核糖体可以识别mRNA和目的蛋白 69、在进行易错PCR时，添加一定浓度的锰离子，其作用是 （ C ） A、降低DNA聚合酶对模板的特异性 B、提高DNA聚合酶对模板的特异性 C、增强DNA聚合酶的稳定性 D、提高DNA聚合酶的活力 70、酶的膜反应器是 （A ）
A、将酶催化反应与膜分离组合在一起 B、利用酶膜进行反应
C、利用半透膜进行底物与产物分离 D、利用半透膜进行酶与产物分离 71、葡萄糖氧化酶可以用于食品保鲜，主要原因是通过该酶的作用可以（ D ）。 A、生成过氧化氢 B、生成葡萄糖酸 C、杀灭细菌 D、除去氧气 72、蛋白质工程的实质是 （ D ）
A. 改变氨基酸结构 B. 改造蛋白质结构 C. 改变肽链结构 D. 改造基因结构 73、蛋白质工程制造的蛋白质是 （ C ）
A. 天然蛋白质 B. 稀有蛋白质 C. 自然界中不存在的蛋白质 D. 血红蛋白质 74、蛋白质工程的基本操作程序正确的是 （ C ）
① 蛋白质分子结构合成 ② DNA合成 ③ mRNA合成 ④ 蛋白质的预期功能 ⑤ 根据氨基酸的序列推出脱氧核苷酸的序列
A. ①→②→③→④→⑤→① B. ⑤→④→③→②→①→② C. ④→①→⑤→②→③→① D. ②→③→⑤→①→②→④ 75、下列各项与蛋白质结构多样性无关的是 （ D ）
A、氨基酸的种类、数目、排列顺序 B、构成蛋白质的多肽链的数目 C、构成蛋白质的肽链的空间结构 D、氨基酸至少含一个氨基和一个羧基 76、蛋白质工程中直接操作的对象是 （ D ）
A、氨基酸的结构 B、蛋白质空间结构 C、肽链结构 D、基因结构
77、当前医学上，蛋白质工程药物正逐步取代第一代基因工程多肽蛋白质类替代治疗剂，则基因工程药物与蛋白质工程药物的区别是 （ C）
A、都与天然产物完全相同 B、都与天然产物不相同
C、基因工程药物与天然产物完全相同，蛋白质工程药物与天然产物不相同 D、基因工程药物与天然产物不相同，蛋白质工程药物与天然产物完全相同 78、关于蛋白质工程的说法错误的是 （ B ）
A、蛋白质工程能定向改造蛋白质的分子结构，使之更加符合人类的需要 B、蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子结构 C、蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子 D、蛋白质工程又称为第二代基因工程
79、干扰素经过改造可长期储存，从蛋白质水平上应改变的是 （ D ）
A. 光氨酸 B. 精氨酸 C. 谷氨酸 D. 半光氨酸 80、天然蛋白质合成遵循的法则是（ A ）
A. 中心法则 B. 转录 C. 翻译 D. 复制 三、判断题
1、 基因是不可分割的最小的重组单位和突变单位。（×） 2、 B型双螺旋DNA的稳定因素为氢键和碱基堆砌力。（√） 3、 cDNA文库不包含内含子。（√）
4、 Western杂交是DNA—RNA之间的杂交。（×） 5、 DNA双酶切时，要先低盐缓冲液，后高盐缓冲液。（√）
6、如果需要得到真核生物基因的完整序列，必须用基因组文库方能达到。（√） 7、基因是不可分割的最小的重组单位和突变单位。（×） 8、克隆的本质特征是生物个体在遗传组成上的完全一致性。（√） 9、假基因不能合成功能蛋白质，是相应的正常基因突变引起的。（√） 10、Northern杂交是DNA-RNA之间的杂交。（√）
11、核酸Tm的高低与DNA分子中G+C的含量有关，碱基数相同的情况下，其含量越高，则Tm越高。（√）
12、 农杆菌介导法和基因枪法是植物转化的主要方法（√） 13、（√）有一些来源不同的限制性内切酶识别的是同样的核苷酸序列，这类酶称为同裂酶。 14、检测外源基因的导入时，PCR的准确性要高于Southern杂交的准确性。（×）
15、转基因食品目前存在的最大问题是我们无法检测某种食品到底是不是转基因食品。（×） 16、转基因生物直接食用的，称为“转基因食品”，而作为加工原料生产的食品，则不能被称为“转基因食品”。 （×）
17、质粒DNA进行电泳时，其三种构型中，开环DNA跑的最快，共价闭环形DNA跑得最慢。（×）
18、在生物技术的五大工程中，生化工程是核心技术，它能带动其他技术的发展。（×） 19、cDNA是以DNA为起始材料，经过复制得到的互补DNA。（×） 20、DNA的复制是全保留不连续复制。（×）
21、基因是一个功能单位，但不是一个不可分割的最小的重组单位和突变单位。（√） 22、Western杂交可以检测外源DNA的导入与否。（×） 23、生物技术是一门新兴的学科。（×）
24、生物技术是现实生产力，也是具有巨大经济效益的潜在生产力，它将是21世纪高技术
革命的核心内容。（√）
25、生物技术是由多学科综合而成的一门新学科。（√）
26、自1996年11月我国正式公布实施《农业生物基因工程安全管理实施办法》以来，我国
已批准6种转基因植物商品化。（√）
27、1977年，美国首先采用大肠杆菌生产了人类第一个基因工程药物——人生长激素释放
抑制剂激素。（√）
28、生物技术是一门新兴学科，它包括当代生物技术和现代生物技术两部分.（√） 29、生物技术主要包括五项技术（工程）。（√）
30、现代生物技术是所有自然科学领域中涵盖范围最广的学科之一。（√）
31、本世纪初，遗传学的建立及其应用，产生了遗传育种学，并于60年代取得了辉煌的成
就，被誉为“第一次绿色革命”。（ √） 32、人类基因组计划英文简称为 HGP.（√）
33、无论用哪种转化方法均可用PBR322作载体（×）
34、进入细菌的外来DNA之所以被降解，是因为细菌只修饰自身DNA，不修饰外来DNA（×）
35、只有粘粒端才可以被连接起来（×）
36、用自身作引物合成的cDNA链，往往cDNA并不完整（×）
37、所谓半保留复制就是以DNA亲本链作为合成新子链DNA的模板，这样产生的双链DNA
分子由一条旧链和一条新链组成。（√） 38、任何细胞都可用作受体细胞。（×） 39、克隆子就是重组子。（×）
40、原核生物细胞是最理想的受体细胞。（√） 41、目的基因来源于各种生物，其中真核生物染色体基因组是获得目的基因的主要来源。（√） 42、E.coli DNA连接酶只能催化双链DNA片断互补黏性末端之间的连接。（√） 43、酶是具有生物催化特性的特殊蛋白质。 （ ╳） 44、酶的分类与命名的基础是酶的专一性。 （√ ） 45、酶活力指在一定条件下酶所催化的反应速度，反应速度越大，意味着酶活力越高。 （√） 46、液体深层发酵是目前酶发酵生产的主要方式。 （√）
47、培养基中的碳源，其唯一作用是能够向细胞提供碳素化合物的营养物质。 （╳） 48、膜分离过程中，膜的作用是选择性地让小于其孔径的物质颗粒成分或分子通过，而把大于其孔径的颗粒截留。 （√）
49、在酶与底物、酶与竞争性抑制剂、酶与辅酶之间都是互配的分子对，在酶的亲和层析分离中，可把分子对中的任何一方作为固定相。 （√）
50、角叉菜胶也是一种凝胶，在酶工程中常用于凝胶层析分离纯化酶。 （╳） 51、α－淀粉酶在一定条件下可使淀粉液化，但不称为糊精化酶。 （╳） 52、酶法产生饴糖使用α－淀粉酶和葡萄糖异构酶协同作用。 （╳） 53、外源蛋白基因可以与噬菌体的外膜结构蛋白基因形成融合蛋白基因，在噬菌体表面展示 （╳）
54、重组质粒载体可以通过细胞转化方法将重组DNA转入受体细胞 (√)
55、通过DNA重拍技术进行酶基因的体外随机突变，可以获得大量的正突变基因。（╳ ） 56、基因家族重排技术需要经过不加引物的多次PCC循环，使DNA的碱基序列重新排布而引起基因突变。 (√)
57、酶在水溶液中催化的立体选择性通常比在有机介质中催化的立体选择性强。（√） 58、包埋法可以用于酶、细胞和原生质体的固定化。 （√）
59、固定化原生质体由于细胞内的结构完整，可以保持细胞原有的生命活动能力。（╳ ） 60、采用共价结合法制备得到的固定化细胞具有很好的稳定性。 （√）
四、填空题
1、 基因工程技术是生物技术的核心技术。 2、 PCR包括三个步骤_变性，退火，延伸。
3、基因工程的实施包括四个必要条件：工具酶、基因、载体和受体细胞。 4、限制性内切酶酶切DNA片断后通常有两类末端：平末端、黏性末端。 5、基因组文库中包括有内含子和外显子，而cDNA 文库中则不含内含子
6、生物技术主要是指基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程、蛋白质工程。 7、现代生物技术是以20世纪70年代DNA重组技术的建立为标志。
8、细胞工程包括植物细胞的体外培养技术、细胞融合技术、细胞器移植技术、克隆技术、
干细胞技术。
9、酶工程包括酶的固定化技术、细胞的固定化技术、酶的修饰改造技术、酶反应器的设计等技术。
10、基因工程操作流程主要包括目的基因分离、与克隆载体重组、转入受体细胞、 筛选和鉴定克隆子。
11、基因工程操作流程主要包括目的基因分离、与克隆载体重组、转入受体细胞、筛选和鉴定克隆子。
12、重组DNA导入植物细胞常采用农杆菌介导的Ti质粒载体转化法、电穿孔法、微弹轰击法、花粉管通道法。导入动物细胞常用的方法有病毒颗粒介导的病毒载体转导法、磷酸钙转染法、显微注射法等。
13、酶的生产方法有提取法，发酵法和化学合成法。
14、酶分子修饰的主要目的是改进酶的性能，即提高酶的活力、减少抗原性，增加稳定性。 15、根据分子中起催化作用的主要组分的不同，酶可以分为 蛋白酶 和 核酶 两大类。 17、发酵动力学是研究发酵过程中细胞生长速率，产物生成速率 ，基质消耗速率及其影响因素的学科。
18、微生物产酶方式可以分为同步合成型，延续合成型，中期合成型，滞后合成型四种。 19、动物细胞培养方法主要有悬浮培养，贴壁培养、固定化细胞培养。 20、定点突变是在DNA序列的 某一特定位点上，进行碱基的改变，从而获得 突变基因 的操作技术。
22、通过人工方法获得的具有催化RNA水解的单链DNA分子，称为 脱氧核酸类酶。 23、细胞工程包括植物细胞的体外培养技术、细胞融合技术、细胞器移植技术、克隆技术、干细胞技术。
24、酶工程包括酶的固定化技术、细胞的固定化技术、酶的修饰改造技术、酶反应器的设计等技术。
25、蛋白质工程的目标是根据对蛋白质 功能 的特定需求，对蛋白质 结构 进行分子设计，根据 中心 法则便可以改造天然蛋白质。 26、指植物体的每一个活细胞都具有该植物的全套遗传信息，具备发育 完整 植株的潜在能力。 27、愈伤组织是在离体培养过程中形成的具有 分生能力 的一团 不规则 细胞，多在外植体切面上产生。
28体外受精和体外早期胚胎发育的基础上，通过卵子切割、性别控制、嵌合体制作、细胞核移植、转基因操作等定向控制、改造和创造新遗传性状的技术统称为胚胎工程，又称发育工程。
五、简答题
1、基因工程操作过程的主要步骤有哪些？ ①分离或合成基因；②通过体外重组将基因插入载体；③将重组DNA导入细胞； ④扩增克隆的基因；⑤筛选重组体克隆；⑥对克隆的基因进行鉴定或测序； ⑦控制外源基因的表达；⑧得到基因产物或转基因动物、转基因植物 2、一种理想的用作克隆载体的质粒必须满足的条件是什么？ （1）具有转录复制起始点。（2）具有抗菌素抗性基因（筛选标志）。 （3）具有若干限制酶切单一识别位点。（4）具有较小的分子量和较高的拷贝数。 4、基因工程研究的理论依据是什么？ （1）不同基因具有相同的物质基础。（2）基因是可切割的（3）基因是可以转移的 （4）多肽与基因之间存在对应关系（5）遗传密码是通用的 （6）基因可以通过复制把遗传信息传递给下一代 5、分离目的基因的途径有哪些？
（1）酶切法（2）PCR法（3）化学合成法（4）基因组或cDNA文库法 7、目的基因克隆的基本方法有哪些？ （1）直接从染色体DNA中分离：
仅适用于原核生物、叶绿体和线粒体基因的分离，较少采用。 （2）人工合成：
根据已知多肽链的氨基酸顺序，利用遗传密码表推定其核苷酸顺序再进行人工合成。适
应于编码小分子多肽的基因。 （3）从mRNA合成cDNA：
采用一定的方法钓取特定基因的mRNA，再通过逆转录酶催化合成其互补DNA（cDNA），除去RNA链后，再用DNA聚合酶合成其互补DNA链，从而得到双链DNA。这一方法通常可得到可表达的完整基因。 （4）利用PCR合成：
如已知目的基因两端的序列，则可采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术，在体外合成目的基因。
（5）从基因文库中筛选：首先建立基因组或cDNA文库，利用探针从文库中筛选目的克隆。 8、cDNA文库和基因组文库的主要差别有哪些？ （1）基因组文库克隆的是任何基因，包括未知功能的DNA序列；cDNA文库克隆的是具有蛋白质产物的结构基因，包括调节基因。
（2）基因组文库克隆的是全部遗传信息，不受时空影响；cDNA文库克隆的是不完全的编码DNA序列，因它受发育和调控因子的影响。
（3）基因组文库中的编码基因是真实基因，含有内含子和外显子，而cDNA文库克隆的是不含内含子的功能基因。
9、简述试述植物细胞融合的程序。
答：1）、植物原生质体分离（l）双亲原生质体制备（2）采用酶法分离原生质体（3）影响原生质体活力的各种因素
2）、 原生质体纯化（1）筛网过滤（2）采用不连续梯度法纯化原生质体（3）质膜稳定剂和渗透压稳定剂
3）、原生质体融合（l）盐融合法（2）高钙和高pH值法（3）聚乙二醇法（4）聚乙二醇和高钙、高pH值结合法（5）电融合法
4）、细胞杂种的选择（1）互补选择法：白化互补、遗传互补、营养互补（2）可见标志选择法：凹穴培养皿法、微吸管法
5）、愈伤组织形成器官分化植株再生（1）基本培养基筛选（2）激素种类和浓度调节（3）渗透压调节
6）、杂种植物鉴定（1）与亲代形态特征比较（2）杂种植物核型分析（3）同工酶谱分析
细胞融合技术的主要过程： ① 制备原生质体（植物）；
② 诱导细胞融合（化学融合剂介导、电融合、病毒融合剂介导等）； ③ 筛选杂合细胞。 10、植物组织培养主要培养方法和程序
1）初代培养：芽、茎段、叶片、花器等外植体在离体培养条件下诱导愈伤组织、侧芽或不定芽、胚状体过程
2）继代培养：更换新鲜培养基来繁殖同种类型的材料（愈伤组织、芽）。 3）生根培养：将芽苗转接到生根培养基上培养成为完整植株的过程 4）驯化移栽
11.人工种子的优点：
①可以不受环境因素制约，一年四季进行工厂化生产；
②由于胚状体是经人工无性繁育产生，因此有利于保存该种系的优良性状； ③与试管苗相比，人工种子成本更低，更适机械化播种。
④可根据需要在人工胚乳中添加适量的营养物、激素、农药、抗生素、除草剂等，
以利于胚状体的健康生长。
人工种子的缺点
①人工种皮的性能尚不尽人意；
②还未找到一种符合多数物种需要的人工胚乳； ③胚状体如何让它处于健康的休眠状态；
④人工种子怎样做到既延长其保存时间又不明显降低萌发率等。 12、植物脱毒技术
①热处理脱毒
②茎尖培养脱毒:生长点。 ③愈伤组织培养脱毒 ④化学疗法脱毒 茎尖培养脱毒的原理：
病毒在植物体内的分布 ：茎尖、根尖分生组织不含病毒粒子或病毒浓度很低。是因为病毒在寄主植物体内随维管系统（筛管）转移．在根尖与茎尖分生组织中没有维管束系统，病毒运动困难。
病毒在寄主茎尖分生组织中的转移速度落后于茎（根）尖的生长速度，导致顶端分生组织附近病毒浓度低，培养便可获得无病毒再生植株。 13、人们对安全性的担忧来自那些方面 人口膨胀；粮食短缺；疾病危害；环境污染；能源危机；资源匮乏；生态平衡破坏；生物物种大量消亡。
14、原生质体培养的意义 （1）为细胞融合奠定基础。（2）是遗传工程的理想受体。（3）理论研究：细胞壁再生、细胞膜离子转运、病毒侵染。 15、胚培养的意义
扩大胚胎发生研究的对象 ①数量多。 ②速度快。 ③结构完整。
体细胞胚一旦形成，一般都可直接萌发，形成小植株，因此成苗率高。 是研究胚发育的良好材料 用于人工种子 16、细胞培养的意义
植物细胞培养具有周期长、细胞抗剪切能力弱、易团聚等特点。同时，植物细胞规模培养的目的是生产天然产物，所以，植物细胞培养反应器的设计不仅要考虑有利于细胞生长，还要考虑有利于产物的积累和分离。
17、动物克隆的程序、克隆的利于弊认知
1）动物克隆的程序：先将含有遗传物质的供体细胞的核移植到去除了细胞核的卵细胞中，利用微电流刺激等使两者融合为一体，然后促使这一新细胞分裂繁殖发育成胚胎，当胚胎发育到一定程度后再被植入动物子宫中
2）克隆的利于弊认知：克隆的利在于：1、医疗方面，可以培育全新人体器官移植人体~ 2、对濒危物种可以起到保护作用。 克隆的弊在于：如果是克隆人，将摧毁现在的社会伦理道德，违背自然规律
一、如何理解生物安全转基因问题
基因工程研究范围广泛，就基因工程动物而言，就有转基因、基因替换、内源基因敲除(如器官移植)等类型的基因工程动物。 （一）、正面
1、生物技术与农业：1） 高产、稳定、优质、抗虫、抗病、除草剂、固氮酶基因等如：抗除草剂大豆2）动物品质改良、提高动物快速生长能力或抗病能力； 3）功能性食品：可饲性疫苗、富含VE的不饱和油料等 2、生物技术与粮食：提高产量、品质 3、抗性基因工程育种
4、转基因动物和植物：“乳腺反应器”工程：生产蛋白质药物。
5、转基因抗虫棉，转基因番茄：抗乙肝，动物乳腺生物反应器，动物血液生物反应器（二）、反面：
1. 环境安全：转基因植物释放引发“超级杂草”。 2.生物安全：
1))转基因植物中35S启动子的生物安全性：活化病毒、增强该毒素的合成、活化并且导致癌变
2))抗生素抗性标记基因的生物安全性
1）抗生素抗性标记基因是否导致的在环境中的传播
2）抗性标记基因是否会通过食物在肠道中水平转移至体内微生物，从而影响抗生素治疗的有效性。3）抗性标记基因产物是否使人体产生抗药性（食品安全性）。 3. 转基因食品的安全性
（1）可能含有已知或未知的毒素，对人体产生毒害作用。 （2）可能含有已知或未知的过敏源，引起人体的过敏反应。（3）食品某些营养成分或营养质量可能产生变化，使人体出现某种病症。
（三）对待转基因技术
任何一种转基因食品要1）国家和政府有相关的法律法规进行约束2）社会监督 3）正确的伦理舆论导向
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