感受态细胞的制备是什么?

发布网友发布时间：2022-04-24 13:36

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热心网友时间：2023-10-14 16:21

感受态细胞的制备常用冰预冷的CaCl2处理细菌的方法制备，即用低渗CaCl2溶液在低温0℃时处理快速生长的细菌，从而获得感受态细菌。

感受态细胞的特点

理化方法诱导细胞，使其处于最适摄取和容纳外来DNA的生理状态。主要原理就是通过处理使细胞的通透性变大，直观的说使得细胞膜表面出现一些孔洞，便于外源基因或载体进入感受态细胞。由于细胞膜的流动性，这种孔洞会被细胞自身所修复。

将构建好的载体转入感受态细胞进行表达，不仅可以检验重组载体是否构建成功，最主要的是感受态细胞作为重组载体的宿主可以进行后续实验，如蛋白质表达纯化等工作。

感受态细胞的特点为*缺陷型：外切酶和内切酶活性缺失，外源基因进入后可稳定存在。感染缺陷型：防止重组细胞扩散污染。重组整合缺陷型：外源基因进入后游离在染色体外，不会发生重组。高转化率：易接受外源核酸。遗传互补：与载体有选择标记互补的表型，能够筛选。