发布网友 发布时间:2022-04-24 14:23
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热心网友 时间:2023-10-16 06:03
首先要确定表达宿主,你的基因要是真核生物的基因,最好还是用酵母做宿主表达目的蛋白。
选择信号肽序列是要看宿主的种类而定,
如果没有信号肽序列,可以考虑利用酵母的某些分泌蛋白或者膜蛋白的信号肽序列作为你的基因的信号肽,如酿酒酵母的转换酶,还有a配对因子(AMF)的信号肽序列。
如果你想用大肠杆菌做宿主,那可以用外膜蛋白,如ompA,但是大肠杆菌的蛋白分泌效率低。
通常要做分泌型蛋白的表达,所购买的相应的载体上已经准备了信号肽序列,如果没有的话,要去NCBI查找相应的基因信号肽序列,自己做重组。