IP 和 CoIP有什么区别?
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发布时间：2022-04-24 12:24
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热心网友
时间：2023-10-12 18:37
简单的说IP就是用抗体把你要的蛋白免疫沉淀下来，然后去检测它。例如蛋白A在细胞内的蛋白量不同，或者有着不同的翻译后修饰，这是可以用A蛋白的抗体+prorein A beads来IP，从细胞中把A拉下,再用特异的抗体（如磷酸化，泛素化抗体）来检测A的变化。
而co-ip的原理是一样的，自是它检测的是和A相互作用的蛋白，也就是说用A的抗体把A拉下来后，用和A相互作用蛋白B的抗体去检测，来证明A和B之间的相互作用。
拓展资料：
免疫沉淀的实验步骤：
（1）收获细胞，加入适量细胞IP裂解缓冲液（含蛋白酶抑制剂），冰上或者4℃裂解30min, 12,000g离心30 min后取上清；
（2）取少量裂解液以备Western blot分析，剩余裂解液将1μg相应的抗体和10-50 μl protein A/G-beads加入到细胞裂解液，4°C缓慢摇晃孵育过夜；
（3）免疫沉淀反应后，在4°C 以3,000 g速度离心5 min,将protein A/G-beads离心至管底；将上清小心吸去，protein A/G-beads用1ml裂解缓冲液洗3-4次；最后加入15μl的2×SDS 加样缓冲液，沸水煮10分钟；
（4）SDS-PAGE, Western blotting或进行质谱分析。
参考资料：免疫共沉淀百度百科词条
热心网友
时间：2023-10-12 18:37
IP是在已知一种蛋白质的抗体情况下，直接用这种抗体将目标蛋白质提取出来，是一种提纯蛋白质的方法。
Co-IP主要用于检测蛋白质与蛋白质之间连接作用，如你想检测蛋白质A与蛋白质B之间是否有相互作用，你手中又有蛋白质A的特异抗体，就将蛋白质A和抗体加入到含有蛋白质B的细胞解液中去，利用抗体提纯，如果蛋白质A，B之间有相互作用，则最后提纯产物是抗体——蛋白质A——蛋白质B。由于最后终产物是多种蛋白质复合物，所以这种技术叫做co-immunoprecipitation，和IP的用途区别还是很大的。
热心网友
时间：2023-10-12 18:37
coip
?
