发布网友 发布时间:2022-04-24 12:24
共2个回答
热心网友 时间:2023-10-12 18:37
免疫共沉淀基于抗原抗体特异性结合的原理,体外验证两种分子之间是否存在相互作用的技术。它是免疫沉淀的延伸。基本原理是在含有已知抗原的细胞裂解液中,将已知抗原作为靶蛋白,检测裂解液中可能存在与之有相互作用的蛋白。加入特定的抗体以及Protein A-Beads,会形成“抗原-抗体-Protein A-Beads”的复合物。在抗原抗体特异性结合沉淀靶蛋白的同时,存在相互作用的蛋白也能被沉淀下来,最终得到“蛋白-蛋白”的复合物。验证是否有相互作用蛋白的存在。
免疫沉淀与免疫共沉淀实验原理及方法大致相似,所不同的是在免疫共沉淀中对靶蛋白的结合由另一个与之发生相互作用的蛋白所替代。因此实验属于IP还是Co-IP取决于实验的目标是目的抗原还是相互作用蛋白质。
热心网友 时间:2023-10-12 18:37
什么是免疫共沉淀?和免疫沉淀有啥区别
免疫共沉淀的缺点:
(1)可能检测不到低亲和力和瞬间的蛋白质-蛋白质相互作用;
(2)两种蛋白质的结合可能不是直接结合,而可能有第三者在中间起桥梁作用;
(3)必须在实验前预测目的蛋白是什么,以选择最后检测的抗体,所以,若预测不正确,实验就得不到结果,方法本身具有冒险性。
(4)灵敏度没有亲和色谱高。
免疫共沉淀:
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。