发布网友 发布时间:2024-09-27 16:01
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热心网友 时间:2024-10-18 12:13
液相色谱柱根据极性差异分为正相柱(如硅胶表面键合CN或NH3柱)和反相柱(如C18柱),以及离子交换柱、GPC柱等。使用前,需进行性能测试并记录,确保柱子在最佳条件下。
活化是新柱使用前的必要步骤,如反相C18柱,可通过0.5ml/min甲醇冲洗2小时以上,以替换保存液,去除杂质。活化根据柱子类型选择合适方法,活化时勿接检测器。
活化的作用包括排除起泡,使c18集团排列优化,类似新电池。活化后,柱子需妥善维护,包括平衡(用流动相清洗)、再生(根据固定相类型进行清洗)、以及维护(注意pH范围、流动相组成变化等)。
平衡色谱柱时,先用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈冲洗,每日用流动相平衡,确保互溶。再生时,根据极性选择不同的溶剂序列,注意清洗NH2基色谱柱时使用氨水。维护时,使用预柱保护,避免极端pH和流动相变化,流动相需脱气和过滤。
使用时需注意:储存液与样品流动相是否兼容;流动相配制要求;样品清洁处理;每天实验后,用甲醇/水冲洗盐分;长期保存要选合适溶剂;柱压异常时,检查色谱柱头、填料、盐结晶和pH影响。
对于新买气相色谱柱,活化时间通常1-2小时,活化过程需在低温至高温逐步进行。