IB/IP/WB常用内参和标签

发布网友 发布时间：2024-09-26 17:53

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热心网友 时间：2024-10-06 18:57

在WB（Western Blot）实验中，内参蛋白是不可或缺的参照物，它们用于调整和评估实验结果中的蛋白表达差异。选择内参的首要条件是其在不同组织细胞中表达稳定，如β-actin、β-tubulin、GAPDH和Lamin B等常见的内参蛋白，它们的表达量恒定，适合监控实验体系的正常运作。

β-actin，作为细胞浆内的肌动蛋白，尽管在大部分细胞中表达丰富，但在特定情况下如脂肪组织，其表达量会减少。β-tubulin，作为微管蛋白，是稳定的内参之一，常用于观察细胞微管结构。GAPDH，作为糖酵解酶，普遍存在于所有组织中，其表达量恒定，很少受外部因素影响。

除了内参，标签蛋白如融合蛋白表达的Flag、His、GST和GFP也扮演着重要角色。Flag标签通过亲和层析简便纯化，并且能通过抗体检测；His标签因与镍结合的特性，方便IMAC纯化；GST标签由于其高度可溶性和大肠杆菌表达的便利，广泛应用于表达系统；GFP则以荧光特性在生物成像中应用广泛。

Myc和HA标签，如Myc标签用于细胞生物学检测，而HA标签因其小肽结构和易于检测的特点，常用于标签蛋白融合。这些标签蛋白不仅简化了蛋白研究过程，还提供了方便的检测手段，是实验中的重要工具。

热心网友 时间：2024-10-06 18:55

在WB（Western Blot）实验中，内参蛋白是不可或缺的参照物，它们用于调整和评估实验结果中的蛋白表达差异。选择内参的首要条件是其在不同组织细胞中表达稳定，如β-actin、β-tubulin、GAPDH和Lamin B等常见的内参蛋白，它们的表达量恒定，适合监控实验体系的正常运作。

β-actin，作为细胞浆内的肌动蛋白，尽管在大部分细胞中表达丰富，但在特定情况下如脂肪组织，其表达量会减少。β-tubulin，作为微管蛋白，是稳定的内参之一，常用于观察细胞微管结构。GAPDH，作为糖酵解酶，普遍存在于所有组织中，其表达量恒定，很少受外部因素影响。

除了内参，标签蛋白如融合蛋白表达的Flag、His、GST和GFP也扮演着重要角色。Flag标签通过亲和层析简便纯化，并且能通过抗体检测；His标签因与镍结合的特性，方便IMAC纯化；GST标签由于其高度可溶性和大肠杆菌表达的便利，广泛应用于表达系统；GFP则以荧光特性在生物成像中应用广泛。

Myc和HA标签，如Myc标签用于细胞生物学检测，而HA标签因其小肽结构和易于检测的特点，常用于标签蛋白融合。这些标签蛋白不仅简化了蛋白研究过程，还提供了方便的检测手段，是实验中的重要工具。