[经验分享]细胞传代怎么做?——新手入门需要知道这几点

发布网友发布时间：2024-09-27 04:02

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传代培养是细胞生物学实验的基础，当细胞满瓶后，需进行稀释和分瓶以保持生长。以下是新手入门时需要注意的关键步骤：

无菌操作至关重要，确保使用无菌设备，如培养瓶、超净工作台等，并对工作台进行消毒。

观察细胞形态，确定传代时机和稀释比例。悬浮细胞直接分瓶，贴壁细胞需先用胰蛋白酶/EDTA消化，骨髓干细胞通常使用0.25%胰蛋白酶加0.1%EDTA消化液，消化时间视细胞特性而定。

消化后，轻轻吹打细胞形成悬液，离心去除上清液，加入完全培养基混匀，确认分散均匀，避免成团。

以适当比例进行分瓶，如骨髓充间质干细胞通常以1:3传代，传至3代后纯度高。细胞接种后在适宜条件下继续培养，观察生长情况。

传代过程中需注意无菌、适度消化、消化液浓度、吹打力度和频率，以及传代次数不宜过多，以减少对细胞生长和遗传特性的影响。

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