发布网友 发布时间:2024-09-27 04:02
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细胞传代培养是生物医学实验中常见的一种技术,它利用细胞系的快速生长特性,为实验提供所需的细胞资源。细胞系与原代细胞的培养有所区别,需要特定的生长因子混合物,并需要密切关注以防止过度生长。当细胞密度达到90%时,通常会进行重悬、洗涤或重新接种,以维持细胞健康并控制扩增。
细胞传代的核心在于维持细胞健康和防止代谢废物积累。传代的细胞分为肿瘤细胞系、永生化细胞系和干细胞系,每种类型细胞的培养条件和管理方式都有所不同。例如,干细胞如胚胎干细胞需定期传代以保持多能性,而贴壁细胞如组织细胞则需在70-90%密度时进行传代,以保持细胞活力。
传代过程需要特定的设备和试剂,如无菌技术、培养液(包含血清、抗生素和生长因子)、pH指示剂等。培养液颜色的变化是监测营养消耗和细胞健康的重要指标,而消化酶如胰酶的使用则是分离细胞的关键步骤。细胞通常在37℃、5%二氧化碳的培养箱中生长,传代后根据细胞类型和扩增需求选择合适的接种密度和培养容器。
传代细胞的步骤包括监测生长状况、洗涤、消化、离心、重悬和接种。在应用上,人胚胎干细胞的传代对于维持其多能性至关重要,而某些细胞可能需要采用细胞刮或特殊的方法处理以适应其特性。