巢式PCR巢式PCR的实验步骤
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发布时间：2024-10-23 15:29
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时间：2024-11-02 09:51
巢式PCR是一种高度特异性的PCR技术，其实验步骤涉及两轮PCR扩增。首先，使用蓝色的第一对引物结合到目标DNA模板上。理论上，第一对引物可能与具有相似结合位点的片段结合，产生多种产物。然而，仅有一种产物是真正的目标片段。在第二步中，使用红色标记的第二套引物对第一轮PCR扩增的产物进行第二轮PCR扩增。这里的关键在于第二套引物位于第一轮扩增产物内部，而非目标片段。因此，只有目标片段可能与第二套引物结合，大大降低了非特异性扩增的风险。通过这种方式，巢式PCR确保了第二轮PCR产物几乎或完全不含非特异性扩增的污染，提高了实验的精确性和可靠性。
